LARA ARIAS, JORGE (2006) Cultivo de condrocitos humanos autólogos para la implantación en lesiones articulares. Masters thesis, Universidad Autónoma de Nuevo León.

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Abstract

Introducción. El implante de condrocitos autólogos (ICA) es una técnica terapéutica diseñada para reparar lesiones del cartílago hialino ubicado en la superficie de las articulaciones sinoviales. Objetivo. Implementar el cultivo de condrocitos autólogos humanos para el transplante en defectos articulares. Material v Métodos. Se obtuvieron condrocitos humanos a partir de una biopsia de cartílago tomada de la rodilla de un paciente de 23 años con una lesión osteocondral en el domo del astràgalo izquierdo. Se realizó una curva de crecimiento y se estimó el tiempo de duplicación y la viabilidad de condrocitos cultivados en medios suplementados con SHA o SBF. A las células cultivadas en un medio suplementado con SHA, se les realizaron dos pasajes para aumentar la población a 15 x 10® células, posteriormente se incluyeron en una matriz de fibrina para generar un implante de condrocitos autólogos que fue colocado en la lesión del paciente 24 horas post-inclusici celular. Se comparó la matriz extracelular (MEC) de una biopsia de cartílago con la MEC sintetizada por los condrocitos establecidos en monocapa y al ser incluidos en la matriz tridimensional, se realizaron pruebas de RT-PCR e IHQ a los 7, 14 y 21 días para la detección de Sox 9, de colágeno tipo I y II. A manera de seguimiento, se realizó IHQ a una biopsia tomada del injerto seis meses post-implante. Resultados. No se encontró diferencia significativa en el tiempo de duplicación ni en la viabilidad de los condrocitos cultivados con SHA o SBF. El colágeno de tipo II y el factor de transcripción Sox 9, estuvieron presentes en la biopsia de cartílago hialino, en donde no se observó el colágeno tipo I. El colágeno I se detectó desde la primera semana en la monocapa, sugiriendo un proceso de desdíferenciación. Sin embargo, las células expresaron colágeno II y el factor Sox 9 en todo el período de cultivo. Durante la permanencia de los condrocitos en la fibrina, fue más apreciable el colágeno I. No obstante, también se pudo distinguir el factor Sox 9 y el colágeno de tipo II. La IHQ confirmó estos hallazgos y reveló la extensión de la MEC formada. Muchos de los condrocitos incluidos en la fibrina demostraron su viabilidad migrando a la caja de cultivo para establecerse en monocapa Seis meses postimplante, el paciente se reportó incorporado a sus actividades diarias, se tomó una biopsia en el borde extemo del injerto, y se encontró que el colágeno de tipo I estaba rellenando esa zona del implante. Conclusión. El ICA permitió la recuperación clínica del paciente tratado, aunque a los seis meses postimplante, se detectó predominantemente colágeno tipo I. Perspectivas. Deberá hacerse una valoración del tipo de cartílago presente en el injerto a un tiempo más prolongado para determinar si hay formación de cartílago hialino.

Item Type: doctoralThesis (Masters)
Additional Information: Maestría en ciencia con especialidad en biología molecular e ingeniería genética
Uncontrolled Keywords: Sistema musculoesquelético.
Creators:
CreatorsEmailORCID
LARA ARIAS, JORGEUNSPECIFIEDUNSPECIFIED
Subjects: CONACYT > info:eu-repo/classification/cti/3
Divisions: Dirección de Educación Digital
Depositing User: Lic. Jesús E. Alvarado
Date Deposited: 20 Aug 2015 17:05
Last Modified: 09 Jan 2019 20:56
URI: http://riacti.uanl.mx/id/eprint/107

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